CATEGORII DOCUMENTE |
Astronomie | Biofizica | Biologie | Botanica | Carti | Chimie | Copii |
Educatie civica | Fabule ghicitori | Fizica | Gramatica | Joc | Literatura romana | Logica |
Matematica | Poezii | Psihologie psihiatrie | Sociologie |
Membrana celulara
Microscopie
nLa M.O. membrana celulara nu este vizibila deoarece grosimea sa , de ordinul zecilor de nm , este sub limita de rezolutie a acestuia.
nExaminate la M.E. cu o marire de ordinul zecilor de mii , celula apare delimitata de o linie intunecata subtire, continua.
Ultrastructura
nPlasmalema
nGlicocalix
nSchelet asociat membranei
PLASMALEMA
nLa mariri de peste 50000 de ori, membrana celulara are o structura trilaminara , fiind alcatuita din doua benzi intunecate si una clara , care le separa. Acest aspect trilaminat este clasic denumit PLASMALEMA
nsubstrat molecular bistratul lipidic si proteinele asociate acestuia.
nCele doua benzi electronodense ale plasmalemei se evidentiaza datorita contrastarii cu CITRAT DE PLUMB, care se leaga de gruparile fosfat ale fosfolipidelor.
GLICOCALIX
nPe versantul extern al plasmalemei exista o retea de filamente fine , ramificate ce alcatuiesc GLICOCALIXUL sau GLICOLEMA
nsubstrat molecular: lanturi de oligozaharide.
CITOSCHELETUL ASOCIAT MEMBRANEI
n retea alcatuita din microfilamente orientate neregulat, anastomozate intre ele
nalcatuire proteica. Prin reteaua de proteine care il formeaza, citoscheletul este ancorat la plasmalema si se continua spre interiorul celulei cu CITOSCHELETUL ASOCIAT MATRICEI
MODALITATI DE STUDIERE A MEMBRANEI CELULARE
1. STUDIUL ULTRASTRUCTURAL GENERAL
a. Microscopie electronica de transmisie
i. Pe sectiuni
ii. Pe preparate de inghetare- fracturare
b. Microscopie electronica de baleiaj
TEHNICA DE INGHETARE - FRACTURARE
nFracturare - la nivelul portiunii hidrofobe a bistratului lipidic membranar.
nSe pot studia fetele interne ale celor doua straturi lipidice ale membranei : fata externa E si cea interna P
nProteinele membranare sunt mai bogate pe fata P fiind ancorate de citoschelet.
Inghetare
- fracturare
STUDII SPECIFICE
Citochimie ultrastructurala
- trasori electronodensi cu
i. Feritina
ii. Peroxidaza de hrean
iii. Citocrom c ( hempeptizi)
iv. Aur coloidal
Metode biochimice
i. Marcare pe celule intacte
1. radioactiva
2. pentru interactiuni afine ( in sistem haptene/anticorp sau biotina/avidina )
ii. Separare de fractiuni purificate de membrane
Metode biochimice
nHaptenele sunt molecule mici , care inserate pe un lant polipeptidic devin puternic imunogene. Impotriva lor se pot astfel ridica anticorpi. Ei se pot utiliza apoi in cromatografia de afinitate pentru purificarea proteinelor de membrana pe care a fost inserata haptena.
Metode biochimice
nSistemul biotina/avidina are la baza afinitatea deosebita a avidinei, o proteina , fata de biotina. Aceasta interactiune specifica este utilizata in separarea biochimica prin afinitate a unor proteine de membrana pe care s-a inserat biotina. Acest sistem este folosit si in studii citochimice folosind trasori electronodensi cu avidina.
STUDIUL CITOCHIMIC
prin citochimie
a. FILIPINA - pentru colesterol , formand agregate care dezorganizeaza membrana si se observa la M.E.
b. POLIMIXINA B - pentru fosfolipidele anionice- PS si PI .
nse poate evidentia distributia asimetrica a lipidelor in cele doua straturi ale bistratului lipidic:
1. colesterolul este distribuit preferential pe fata E
2. fosfolipidele pe fata P
STUDIUL CITOCHIMIC
prin metode biochimice - dupa fractionarea membranelor si extragerea lipidelor
a. Cromatografie in strat subtire
b. Cromatografie in faza lichida de inalta performanta ( HPLC)
i. Cu faze normale - clase de lipide
ii. Cu faze inversate - tipuri de lipide dintr-o clasa
c. Cromatografie in faza gazoasa
STUDIUL PROTEINELOR
prin citochimie
a. liganzi marcati cu feritina , peroxidaza de hrean etc.- pentru receptori
b. anticorpi marcati - pentru orice proteina
metodele biochimice
a. electroforeza in una sau doua dimensiuni
b. cromatografie in faza lichida clasica si /sau de inalta performanta
i. gel-filtrare
ii. schimb ionic
iii. prin afinitate
STUDIUL COMPONENTEI GLUCIDICE
nLECTINELE - sunt proteine sau glicoproteine ce interactioneaza specific cu anumite secvente glucidice, au cel putin doua situsuri de interactiune identice si nu sunt de origine imuna
n se folosesc fie prin marcarea directa radioactiva sau prin compusi electronodensi
- in citochimie
a. lectine marcate
b. lectina + glicoproteina marcata
c. ( endo)glicozidaze + citochimie cu lectine
STUDIUL COMPONENTEI GLUCIDICE
nCele mai cunoscute lectine sunt
a. concanavalina a care se leaga specific de structuri ce contin manoza sau glucoza
b. lectina din germeni de grau care recunoaste anumite tipuri de acizi sialici
c. lectina din arahide care recunoaste galactoza terminala
tehnici biochimice
a. cromatografie de afinitate ( pentru glicoproteine)
b. cromatografie in strat subtire ( pentru glicolipide)- dupa fractionare si separarea lipidelor
MODELUL MOZAIC FLUID
Membrana celulara este o structura fluida alcatuita di proteine , lipide si glucide.
n lipidele alcatuiesc un bistrat continuu,
n proteinele sunt dispuse in mozaic fiind atasate de o parte si de alta a bistratului lipidic sau patrund in acesta strabatandu-l
n glucidele sunt situate pe versantul extern al membranei si sunt oligozaharide atasate la proteine sau lipide.
JONCTIUNI CELULARE
Jonctiuni speciale - zonula occludens
nJonctiunea stransa = zonula occludens
uME: "inchiderea " spatiului intercelular, prin apozitia membranelor a 2 celule adiacente
Jonctiuni speciale - Desmozomii
Jonctiuni speciale -Hemidesmozomii
ME: componenta celulara are acelasi aspect ca desmozomii, dar localizarea difera - la polul bazal al celulei
Politica de confidentialitate | Termeni si conditii de utilizare |
Vizualizari: 1128
Importanta:
Termeni si conditii de utilizare | Contact
© SCRIGROUP 2024 . All rights reserved