CATEGORII DOCUMENTE |
Astronomie | Biofizica | Biologie | Botanica | Carti | Chimie | Copii |
Educatie civica | Fabule ghicitori | Fizica | Gramatica | Joc | Literatura romana | Logica |
Matematica | Poezii | Psihologie psihiatrie | Sociologie |
REACTIA DE FIXARE A COMPLEMENTULUI (RFC):
Ag: globule rosii (hematii de berbec),
Ac: ser antihematii corespunzator, obtinut prin inocularea hematiilor de berbec la iepure. Fixarea C` pe cel de- al doilea sistem antreneaza liza hematiilor, vizibila cu ochiul liber.
Prin incalzirea serului de testat la 56C, timp de 30 min, actiunea complementului este inhibata; eventualii Ac prezenti in ser nu sunt distrusi la aceasta temperatura.
Reactia propriu- zisa:
Daca serul de cercetat contine Ac suspectati (Reactie +), Complementul ramane fixat in primul sistem imun Ag/ Ac, nu se "leaga" de sistemul hemolitic- indicator, deci nu are loc hemoliza (hematiile din godeuri cad in buton, cu lichid clar deasupra),
Daca serul de cercetat nu contine Ac cautati (Reactie -), Complementul nu se fixeaza de primul sistem imun Ag / Ac, ramane "liber" si se leaga la cel de- al 2- lea complex Ag/ Ac - sistem indicator, hemolitic, contribuind la obtinerea hemolizei.
Hemoliza indica un rezultat negativ (lipsa Ac suspectati in serul de bolnav),
Absenta hemolizei/ hematii in buton: indica un rezultat pozitiv (prezenta Ac cautatti in serul de bolnav).
Materiale necesare reactiei (Reactivi):
Serul de cercetat inactivat termic,
Antigenul (suspensii corpusculare microbiene, solutii coloidale, Ag standardizat, titrat, gata de utilizat),
Complementul (alexina): reprezentat de ser de cobai (cantitatea cea mai mare de complement). In momentul utilizarii, C` este titrat, pentru determinarea unei unitati alexice sau cantitatea minima de complement care determina hemoliza totala a 1 mL de sistem hemolitic la 37C. Titrarea C` se face punand in contact dilutii crescande de ser de cobai cu cantitate fixa de sistem hemolitic (termostatare 30 min, la 37C),
Sistemul hemolitic: amestec de hematii de berbec (Ag) 5% in ser fiziologic si ser hemolitic antioaie (Ac),
Tehnica de lucru:
RFC se realizeaza in doua faze:
daca in ser sunt Ac suspectati, sistemul imun Ag/ Ac fixeaza alexina,
daca in ser nu sunt Ac cautati, complexul imun nu se formeaza si alexina ramane libera.
Cand in faza I se produce reactia Ag/ Ac (datorita prezentei Ac specifici), alexina se fixeaza pe aceste complexe si nu mai produce liza sistemului hemolitic; hematiile cad in buton.
Schema reactiei:
Nr. tub |
1 |
2 |
Martor ser cercetat 3 |
Martor Ag 4 |
Martor alexina 5 |
Martor Sistem Hemolitic 6 |
Martor sigur (+) 7 |
Martor sigur (-) 8 |
Ser de cercetat |
0,1 |
0,2 |
0,3 |
- |
- |
- |
- |
- |
Ser sigur (+) |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
0,2 |
- |
Ser sigur (-) |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
0,2 |
Ag diluat |
0,2 |
0,2 |
- |
0,4 |
- |
- |
0,2 |
0,2 |
C` dil conf titrului |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
- |
0,4 |
0,4 |
Ser fiziol |
0,8 |
0,7 |
0,8 |
0,7 |
1,1 |
1,5 |
0,7 |
0,7 |
Termostat 30 min, la 37C |
||||||||
Sistem hemolitic |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
Citirea reactiei:
eprubetele 1 si 2 contin serul de cercetat in cantitati de 0,1 si 0,2 mL,
in aceste eprubete, daca serul provine de la persoana sanatoasa, se produce hemoliza, lichidul se limpezeste (complement liber in faza I),
daca serul provine de la bolnav, nu se mai produce hemoliza, deoarece complementul a fost fixat de complexul Ag/ Ac present in serul bolnavului,
Interpretarea rezultatelor:
Tub 1 |
Tub 2 |
|
Reactie slab (+) |
hemolizat |
Partial hemolizat |
Reactie pozitiva ++, +++ |
Partial hemolizat |
nehemolizat |
Reactie intens pozitiva ++++ |
nehemolizat |
nehemolizat |
Reactie negativa |
hemolizat |
hemolizat |
Aplicatii:
Reactia Bordet- Wasserman (RBW): serodiagnosticul luesului,
RFC in diagnosticul rickettsiozelor: tifos exantematic,
RFC in diagnosticul serologic al leptospirozelor (leptospira biflexa Patoc),
RFC in diagnosticul febrei recurente, brucelozei, toxoplasmozei, febrei tifoide, bacterioze,
RFC in serodiagnosticul gonoreei cronice,
* Pentru cresterea sensibilitatii si specificitatii se folosesc tehnici care inlocuiesc fixarea C` la cald (1 ora la 37) cu reactii de fixare la rece (tehnica Kolmer: 20 ore la +4C),
* Pentru cresterea specificitatii se folosesc Ag cu un grad mare de purificare sau se foloseste RFC cantitativ, in care reactia se executa cu numar mare de dilutii in ser de cercetat.
* Pentru utilizarea reactiei RFC in actiuni largi de depistare se
folosesc micrometode executate in placi cu godeuri in cadrul carora se face
titrare unica (in "tabla de sah") a C`; se folosesc concomitent Ag variate
pentru diagnosticul sifilisului, rickettsiozelor, leptospirozelor, brucelozei
(Tehnica Bredstreet si
Avantajele reactiei: sensibilitate, specificitate inalte, grad inalt de reproductibilitate.
Politica de confidentialitate | Termeni si conditii de utilizare |
Vizualizari: 5911
Importanta:
Termeni si conditii de utilizare | Contact
© SCRIGROUP 2024 . All rights reserved